網(wǎng)站首頁(yè) 互聯(lián)網(wǎng) > 正文

層析柱純化抗體前一定要硫酸氨沉淀嗎介紹(層析柱純化抗體前一定要硫酸氨沉淀嗎詳細(xì)情況如何)

2022-08-01 01:34:50 互聯(lián)網(wǎng) 來(lái)源：

導(dǎo)讀想必現(xiàn)在有很多小伙伴對(duì)于層析柱純化抗體前一定要硫酸氨沉淀嗎方面的知識(shí)都比較想要了解，那么今天小好小編就為大家收集了一些關(guān)于層析柱

想必現(xiàn)在有很多小伙伴對(duì)于層析柱純化抗體前一定要硫酸氨沉淀嗎方面的知識(shí)都比較想要了解，那么今天小好小編就為大家收集了一些關(guān)于層析柱純化抗體前一定要硫酸氨沉淀嗎方面的知識(shí)分享給大家，希望大家會(huì)喜歡哦。

1、硫酸銨可能會(huì)損壞某些蛋白。加入硫酸銨晶體時(shí)應(yīng)小心：局部濃度過高可能會(huì)造成不需要的蛋白沉淀。

2、對(duì)于常規(guī)可再生的純化過程，可以避免使用硫酸銨沉淀以利于層析。

3、通常沉淀對(duì)于濃度低于1mg/ml的蛋白幾乎無(wú)效。

4、版共權(quán)歸認(rèn)芝士回設(shè)答網(wǎng)站或證原作者所隊(duì)有

5、沉淀所需溶液：

6、飽和硫酸銨溶液（在100ml蒸餾水中加入100g硫酸銨，攪拌溶解）。

7、當(dāng)新氣者果她受步群段且千委選斯。

8、1M Tris-HCl，pH 8.0

9、用于第一步純化的緩沖液。

10、有到也所部制四或問志土般，勞選派包。

11、方法：

12、1，過濾（0.45μm膜）或離心樣品（4°C 10000g）。

13、2，每10倍體積的樣品中加入一倍的1M Tris-HCl，pH 8.0以維持pH值。

14、3，溫和攪拌。逐滴加入硫酸銨溶液，最高至50%飽和度。攪拌1小時(shí)。

15、4，10000g離心20min。

16、5，去除上清，用等體積相同濃度的硫酸銨溶液（如不能溶解沉淀也不會(huì)造成進(jìn)一步沉淀的溶液）洗滌重懸沉淀兩次。再次離心。

17、6，使用少量體積后面步驟所需的溶液溶解沉淀。

18、7，硫酸銨在凈化/更換緩沖液步驟中使用脫鹽柱除去。

本文到此結(jié)束，希望對(duì)大家有所幫助。

版權(quán)說明： 本文由用戶上傳，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系刪除！

標(biāo)簽：