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想必現在有很多小伙伴對于博凌科為的20XSybr Green I熒光染料有用過的嗎方面的知識都比較想要了解,那么今天小好小編就為大家收集了一些關于博凌科為的20XSybr Green I熒光染料有用過的嗎方面的知識分享給大家,希望大家會喜歡哦。
博凌科為的SYBR Green I與dsDNA 結合熒光信號可增強800~1000倍。在PCR反應體系中,加入過量SYBR Green I熒光染料,它特異性地摻入DNA雙鏈后,熒光信號增強,而不摻入鏈中的SYBR Green I染料分子熒光不變,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。
注意事項:
1.使用濃度對熒光PCR結果的影響
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SYBR Green I的使用濃度是保證熒光定量PCR實驗成功非常關鍵的因素。如果SYBR Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低,這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出。而在高濃度時,將會抑制PCR反應,降低PCR反應效率。所以一般在使用SYBR Green I時應根據實際情況優(yōu)化使用濃度,反應的終濃度為0.2×到1×之間。
2.鎂離子濃度的影響
和為工向權積節(jié)觀劃,存按卻。
提高鎂離子濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應的抑制作用。我們建議在用SYBR Green I進行熒光PCR反應時,鎂離子濃度比無SYBR Green I 的普通 PCR 反應高出0.5~3mM。
的地年第角回壓,且千王。
本文到此結束,希望對大家有所幫助。
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